Предельно допустимые концентрации вредных веществ в воздухе и воде стр.34

Время, затрачиваемое на проведение опыта, составляет 1,5—

2 часа и определяется БПКэ бытовой разводящей воды и степенью развития в ней сапрофитной микрофлоры.

Ц. И. Роговская и Ф. Б. Оршанская [601] вместо трубок Тумберга использовали обычные пробирки с притертыми пробками и одинакового объема (по 10 мл). Вместо метиленового синего был использован в качестве индикатора ТТХ, позволяющий количественно оценить активность дегидрогеназы по образовавшемуся три-фенилформазону. В пробирку 4, заполненную доверху исследуемой водой, вносят 1 мл 0,4% свежеприготовленного раствора ТТХ. Пробирку немедленно закрывают пробкой, при этом вытесняется и^-

быток жидкости. Содержимое пробирки тщательно перемешивают, и пробирку помещают в термостат на инкубацию. Через 2 часа в пробирку добавляют 1 мл ледяной уксусной кислоты для прекращения процесса восстановления ТТХ.

Источником дегидрогеназ являлась иловая жидкость из действующего аэротенка. Она же используется для приготовления исследуемой воды.

Содержимое пробирок отфильтровывают через мембранный фильтр № 6. Осадок помещают в колориметрическую пробирку и заливают 20 мл 95% этанола. Осадок выдерживают в спирте до полного обесцвечивания. Далее содержимое пробирки перемешивают, центрифугируют, и прозрачную, окрашенную в красный цвет спиртовую вытяжку колориметрируют.

Предложенная методика применяется ВНИИ ВОДГЕО и Академией коммунального хозяйства для оценки эффективности работы действующих аэротенков.

А. В. Беспамятнова и С. В. Нагорный с целью стандартизации условий и сокращения времени проведения анализа добавляли к исследуемой жидкости питательный субстрат и суточную культуру сапрофитных микробов, выращенных на мясо-пептонном агаре. Исследуемую жидкость разливают в два ряда пробирок 5 с притертыми пробками и одинакового объема (20 мл). Добавляют по 1 мл" 1 % свежеприготовленного раствора пентона, суточной культуры сапрофитных микробов и 0,01 % раствор метиленового синего. В пробирке с исследуемой жидкостью концентрация микробов должна быть не менее 0,5 и не более 1,0 млн микробных тел в 1 мл. Пробирки закрывают пробками, при этом избыток жидкости выливается. Пробирки устанавливают на штативе 6 в изготовленный из органического стекла компаратор 7 при температуре 37 °С. Постоянство температуры достигается с помощью электроподогревателя 8 по показаниям контактного термометра 10, связанного с ним через реле 9, а также перемешиванием воды 13 мешалкой 12, приводимой в движение электромотором 11. Число оборотов мешалки регулируется ЛАТРом 14. Время обесцвечивания метиленового синего регистрируется секундомером, начиная с момента установки пробирок в компаратор. Контролем служит дехлорированная водопроводная вода. Расчет активности фермента производится по формуле:

А = 100- — -100%

где Топ — время обесцвечивания раствора метиленового синего в опытной пробирке, мищ тк — время обесцвечивания раствора метиленового синего в контрольной пробирке, мин\ А — активность фермента.

При Гоп = тк исследуемое вещество при заданной концентрации его в растворе не влияет на биохимический процесс. Если


⇐ вернуться назад | | далее ⇒